问：HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法

答：

1． 样品量不足，解决办法为增加样品量；

2． 样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子；

3． 样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器；

4． 检测器衰减太多。调整衰减即可；

5． 检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数；

6． 检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗；

7． 检测池中有气泡。解决办法为排气；

8． 记录仪测压范围不当。调整电压范围即可；

9． 流动相流量不合适。调整流速即可；

10． 检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。

问：做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？如何解决？

答：原因可能有：

1． 泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；

2． 比例阀失效，更换比例阀即可；

3． 泵密封垫损坏，更换密封垫即可；

4． 溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；

5． 系统检漏，找出漏点，密封即可；

6． 梯度洗脱，这时压力波动是正常的。

问：我购买的HPLC柱验收测试时柱压过高，请问为什么？

答：柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。

1． 拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；

2． 把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；

3． 将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。这时，如果柱压仍不下降，再检查；

4． 更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题，SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择